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貨號	FS-02R6591

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱：溶藻弧菌快速檢測試劑盒48T 0.1PCR管
貨號：FS-02R6591

規(guī)格：48T 0.1PCR管

分類：水產(chǎn)養(yǎng)殖病害檢測系列）

儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

QQ截圖20200511164444.jpg

試劑配制:

1、酶標板：一塊（96孔）

2、標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、樣品稀釋液：1×20ml。

4、檢測稀釋液A：1×10ml。

5、檢測稀釋液B：1×10ml。

實驗過程：

一、試劑準備

1. DNA模板

2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer 5μl

dNTP mixl 4μl

引物1（10pM） 2μl

引物2（10PM） 2μl

Taq酶（2U/μl） 1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至 50 μl

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優(yōu)勢：

1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。

2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。

3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。

4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。

5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。

四丁基 AR,99.0%(S)-(+)-1-基-1,2-乙二 99%腫瘤標志物檢測試劑盒

四丁基 CP,98.0%(±)芐基氧基羰基-a-膦酰甘氨酯 97%腫瘤抗原檢測試劑盒

四丁基離子色譜級, ≥99.0%(R)-(-)-2- 98%腫瘤壞死因子α檢測試劑盒

四丁基 99%L-(-)-3-乳 98%腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白6檢測試劑盒

四丁基離子對色譜級D-(+)-3-基乳 98%腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化檢測試劑盒

四丁基用于電化學(xué)分析, ≥99.0%(S)-(+)-1-基-1,2-乙二對甲磺酯 98%腫瘤壞死因子β檢測試劑盒

鞣花 96%DL(±)-3-氨基-3-基 98%腫瘤壞死因子γ檢測試劑盒

青霉V 分析標準品Z-L-氨基 98%腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ檢測試劑盒

木托盤

(S)-(-)-1,2,3,4-四氫-3-異喹啉甲 98%腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ檢測試劑盒

防半面具（硅膠） ST-PDGN-對甲磺酰甘氨 98%腫瘤壞死因子配體相關(guān)分子-1A檢測試劑盒

ST-FDG三號濾盒O-(四氫吡喃-2-基)羥 98%腫瘤壞死因子受體1檢測試劑盒

三化銻 AR，99%(S)-(-)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧 97%腫瘤壞死因子受體2檢測試劑盒

三化銻 CP，98%N-Cbz-L-高絲氨內(nèi)酯 98%腫瘤壞死因子受體α檢測試劑盒

三化銻 99.9% metals basis2-(N-Cbz)-3-(N-Boc)-2,3-二氨基 98%腫瘤壞死因子受體超家族成員5檢測試劑盒

三化銻 99.98% metals basisCbz-beta-氨基-L-氨 98%腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子3檢測試劑盒
溶藻弧菌快速檢測試劑盒48T 0.1PCR管人可溶性腫瘤壞死因子α受體（sTNFαR）ELISA試劑盒,5-甲基-1,10-菲咯啉5抗體

人干因子/肥大生長因子（SCF/MGF）ELISA試劑盒,5-甲基-1,10-菲咯啉成纖維生長因子10抗體

人內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子（EG-VEGF）ELISA試劑盒,5-甲基-1,10-菲咯啉XIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白抗體

人游離β絨毛膜促性腺激（f-βhCG）ELISA試劑盒,f-βhCG ELISA5,6-二甲基-1,10-菲咯啉羊抗抗體

小鼠α葡萄糖（a-Glu）ELISA試劑盒,5,6-二甲基-1,10-菲咯啉Fas活化激結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體

激肽釋放6（KLK 6）ELISA聯(lián)免疫吸附試劑盒--專賣四F-box蛋白38抗體

SS 瓊脂四FK506結(jié)合蛋白38抗體

木糖-明膠培養(yǎng)基用于蠟樣芽孢桿菌明膠液化試驗烯Fas活化激結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體

使用方法:

一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。

1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。

3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。

二、樣品 DNA 的制備

7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。

8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。

三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進行）

9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。