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今日詳談細(xì)胞復(fù)蘇,恒遠(yuǎn)整理實(shí)驗(yàn)保存
閱讀:1338 發(fā)布時(shí)間:2014-2-25
何為細(xì)胞復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)?如果知道細(xì)胞的凍存那么就必定聽說過細(xì)胞復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)。今日詳談細(xì)胞復(fù)蘇,恒遠(yuǎn)整理實(shí)驗(yàn)保存。實(shí)驗(yàn)步驟一共是五個(gè),保存的方法是三個(gè)。春天的跡象越來越明顯了,上海恒遠(yuǎn)的新品在逐漸上市,二月的*也還有幾天。旁余的我們就不多說啦,下面就來看看上海恒遠(yuǎn)為您整理出的實(shí)驗(yàn)步驟與保存方法。
按照順序來,首先就是實(shí)驗(yàn)步驟,一共是五個(gè):
1、從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時(shí)搖動(dòng)令其盡快融化。
2、從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細(xì)胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻。
3、離心,1000rpm,5min。
4、棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,計(jì)數(shù),調(diào)整細(xì)胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。
5、次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞復(fù)蘇的實(shí)驗(yàn)步驟出來了,那么它要如何去保存呢?
1、凍存細(xì)胞從液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,輕輕搖動(dòng)冷凍管,使其在1分鐘內(nèi)全部融化(不要超過3分鐘)。
2、解凍后的細(xì)胞可直接接種到含*生長(zhǎng)培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng),24小時(shí)后再用新鮮*培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液,以去除DMSO。
3、如果細(xì)胞對(duì)冷凍保護(hù)劑特別敏感,解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護(hù)劑,然后再接種到含*生長(zhǎng)培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
以上就是本文的中心實(shí)驗(yàn)與保存方法了,我們非常感謝您的支持!上海恒遠(yuǎn)以先進(jìn)的化企業(yè)經(jīng)營(yíng)理念;雄厚的研發(fā)實(shí)力;規(guī)范化的生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn);健全的銷售網(wǎng)絡(luò);完善的技術(shù)服務(wù)體系和廣闊的國(guó)內(nèi)外合作網(wǎng)絡(luò)服務(wù)與。
按照順序來,首先就是實(shí)驗(yàn)步驟,一共是五個(gè):
1、從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時(shí)搖動(dòng)令其盡快融化。
2、從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細(xì)胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻。
3、離心,1000rpm,5min。
4、棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,計(jì)數(shù),調(diào)整細(xì)胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。
5、次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞復(fù)蘇的實(shí)驗(yàn)步驟出來了,那么它要如何去保存呢?
1、凍存細(xì)胞從液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,輕輕搖動(dòng)冷凍管,使其在1分鐘內(nèi)全部融化(不要超過3分鐘)。
2、解凍后的細(xì)胞可直接接種到含*生長(zhǎng)培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng),24小時(shí)后再用新鮮*培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液,以去除DMSO。
3、如果細(xì)胞對(duì)冷凍保護(hù)劑特別敏感,解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護(hù)劑,然后再接種到含*生長(zhǎng)培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
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