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上海恒遠(yuǎn)生物今日來(lái)談培養(yǎng)基的發(fā)展分析
閱讀:1696 發(fā)布時(shí)間:2014-3-25 我們?cè)谇懊娴奈恼轮兄v解過(guò)培養(yǎng)基的鑒別、配制等知識(shí),朋友們知道它是供微生物、植物組織和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽以及維生素和水等。那么朋友們想了解它是怎樣發(fā)展的嗎?下面就來(lái)看看上海恒遠(yuǎn)生物今日來(lái)談培養(yǎng)基的發(fā)展分析
一、科學(xué)研究
1、藥物研究開發(fā),如新藥篩選,疫苗、基因工程藥物、細(xì)胞工程藥物 研究與開發(fā)、單克隆抗體制備等。
2、基礎(chǔ)研究,如藥物作用機(jī)理、基因功能、疾病發(fā)生機(jī)理等研究。
二、細(xì)胞培養(yǎng)基發(fā)展趨勢(shì)
1、無(wú)血清培養(yǎng)基,是設(shè)計(jì)用來(lái)在無(wú)血清條件下促使特殊類型的細(xì)胞生長(zhǎng)或進(jìn)行專門應(yīng)用的培養(yǎng)基。需要添加生長(zhǎng)因子和/或細(xì)胞因子,含有個(gè)別蛋白或大量蛋白組分。主要優(yōu)點(diǎn):增加確定性;性能更一致;容易進(jìn)行純化和下游加工;提高制品安全性和/或產(chǎn)量。
2、無(wú)蛋白培養(yǎng)基,沒(méi)有添加蛋白,但仍然可能包含一些動(dòng)物或植物來(lái)源的成分(如低分子量肽的各種水解物)。
3、化學(xué)限定培養(yǎng)基,不包含有蛋白、水解產(chǎn)物或未知結(jié)構(gòu)的組分,所有的成分均有已知的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
三、細(xì)胞培養(yǎng)基的定義
人工模擬細(xì)胞體內(nèi)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,維持細(xì)胞生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),它是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)。包括天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基。
四、細(xì)胞生存條件
1、基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):
① 糖:六碳糖主要能源、維持滲透壓,含葡萄糖1-5%。
② 氨基酸:維持生存需12種氨基酸。
③ 維生素:細(xì)胞大部分需水溶性B族維生素,Vitc不可少,1-10mg/100ml可促進(jìn)正常細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖。
2、促生長(zhǎng)因子、激素類物質(zhì)
3、其它物質(zhì):基本元素、微量元素、促細(xì)胞貼附物質(zhì)(纖粘連蛋白、層粘連蛋白laminin、IV型膠原、氨基多糖類)
4、水:主要成分和生存環(huán)境,要求高純度水。
5.溫度:哺乳動(dòng)物及人源細(xì)胞zui適培養(yǎng)溫度為35℃—37℃,對(duì)低溫耐受力比高溫強(qiáng)。39℃以上受損→死亡;不低于0℃時(shí)(0℃-34℃),細(xì)胞能生存,但代謝降低、分裂延緩。
6、氣體環(huán)境和pH:需O2、CO2,通氧量過(guò)大對(duì)細(xì)胞有毒害。CO2主要與維持pH有關(guān),細(xì)胞培養(yǎng)*pH為7.2—7.4,通過(guò)緩沖系統(tǒng)和調(diào)節(jié)CO2含量,維持正常pH。開放培養(yǎng)要求5%CO2環(huán)境、HEPES(羥乙基哌嗪乙硫磺酸)10—50mmol/ml可防止pH變化。含Earle’s緩沖系統(tǒng)的培養(yǎng)基適合于5%CO2的培養(yǎng)條件,Hanks’緩沖系統(tǒng)的培養(yǎng)基僅含有0.35g/L NaHCO3,不能用于5%CO2的環(huán)境,若放入CO2培養(yǎng)箱,溶液將迅速變酸,使用時(shí)應(yīng)注意。
7、濕度和光:開放培養(yǎng)相對(duì)濕度控制在95%。細(xì)胞培養(yǎng)需避光,紫外線或可見光可造成核黃素、酪氨酸、色氨酸等產(chǎn)生有毒的光產(chǎn)物,抑制細(xì)胞生長(zhǎng),降低其貼壁能力。
8、影響細(xì)胞生長(zhǎng)的其它因素:接觸橡膠用品、收集細(xì)胞時(shí)離心速度過(guò)大、細(xì)胞接種濃度過(guò)低等。
五、我公司的熱銷培養(yǎng)基
堿性蛋白胨水
TCBS瓊脂
氯化鈉多粘菌素B肉湯基礎(chǔ)(SCPB)
多粘菌素B
精氨酸雙水解酶試驗(yàn)用培養(yǎng)基(AD)
慶大霉素瓊脂
四號(hào)瓊脂基礎(chǔ)
T1N1 瓊脂
T1N0 肉湯
精氨酸葡萄糖斜面瓊脂
mCPC 培養(yǎng)基