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    在ELISA實驗中，顯色與比色是萬萬不可忽略的一個方面。在本月初時，上海恒遠技術專員特別為2014年試劑盒的使用做出了總結與分析。今天我們主要針對ELISA顯示與比色，一起來看本年度ELISA試劑盒年末資料總結大放送。
    ELISA通過顯色反應，在酶標儀上測定吸光度，與標準曲線比較得出可溶性蛋白總量。ELISPOT也是通過顯色反應，在細胞分泌這種可溶性蛋白的相應位置上顯現清晰可辨的斑點，可直接在顯微鏡下人工計數斑點或通過計算機輔助的分析系統對斑點進行計數，1個斑點代表1個細胞，從而計算出分泌該蛋白的細胞的頻率。由于是單細胞水平檢測，ELISPOT比ELISA更靈敏，能從20萬-30萬細胞中檢出1個分泌該蛋白的細胞。捕獲抗體具有高親和力、高特異性、低內毒素的單抗，在研究者以刺激劑激活細胞時，不會影響活化細胞分泌細胞因子。   

    比色前應先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體，然后將板正確放入酶標比色儀的比色架中。以軟板為載體的試驗，需先將板置于標準96孔的座架中，才可進行比色。在加底物液顯色前，先將軟板邊緣剪凈，這樣，此板就可*平妥坐入座架中。比色時應先以蒸餾水校零點，測讀底物孔和空白孔，以記錄本次試驗的試劑狀況。其后可用空白孔以蒸餾水校零點，以上各孔的吸光度需減去空白孔的吸光度，然后進行計算。
    比色結果的表達以往通用光密度，現按規定用吸光度，兩者含義相同。通常的表示方法是，將吸收波長寫于A字母的右下角。

相關問題分析：
1. 酶結合物的稀釋液
    在稀釋液中常加入高濃度的無關蛋白質，通過競爭抑制酶結合物在固相載體上的非特異性吸附。一般還加入能夠抑制蛋白質吸附于塑料表面的非離子型表面活性劑。
2. 正確稀釋酶結合物 
    酶結合物的合適工作濃度需要通過預實驗來確定，濃度過高易導致本底偏高，濃度過低則會導致陽性信號的減弱。酶結合物在使用前稀釋，稀釋后的酶結合物不宜長期保存，因為低濃度的酶結合物極易失活。