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    1、加水于滅菌器內(nèi)到規(guī)定的水平面。
    2、需滅菌的物品（分裝在試管、三角燒瓶中的固、液體培養(yǎng)基），棉塞、硅膠泡沫塞等用防潮紙包好（防止鍋內(nèi)水汽把棉塞淋濕），放入滅菌鍋內(nèi)的套筒中。擺放要疏松，不可太擠，否則阻礙蒸汽流通，影響滅菌效果。
    3、將滅菌鍋蓋的排氣管插人套筒側(cè)壁的凹槽內(nèi)，關(guān)閉滅菌鍋蓋旋緊螺栓，切勿漏氣。
    4、打開放氣閥，加熱，熱蒸汽上升，以排除鍋內(nèi)冷空氣，排氣約5~ l0min，關(guān)閉放氣閥。
    5、關(guān)閉放氣閥后，整個(gè)滅菌鍋成為密閉狀態(tài)，而蒸汽又不斷增多，這時(shí)壓力和溫度都上升，直至壓力表指針達(dá)到所需壓力時(shí)，開始計(jì)時(shí)，通過調(diào)節(jié)熱源，維持此壓力到所需時(shí)間。
    6、滅菌完畢，待壓力自然降至0時(shí)，打開放氣閥，注意不能打開過早，否則突然降壓致使培養(yǎng)基沖騰，使棉塞、硅膠泡沫塞沾污，甚至沖出容器以外。
    7、打開滅菌鍋蓋，取出已滅菌的器皿及培養(yǎng)基。
8、滅菌鍋用完后，將鍋內(nèi)剩余的水倒掉，以免日久腐蝕。