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問題解析之如何從T25瓶轉(zhuǎn)移sf9細(xì)胞
閱讀：1845 發(fā)布時(shí)間：2022-2-17| 提 供 商 | 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司 | 資料大小 | 50.9KB |
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| 資料類型 | PNG 圖片 | 瀏覽次數(shù) | 1845次 |
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我們強(qiáng)力推薦使用脫落細(xì)胞的方法，因?yàn)檫@項(xiàng)技術(shù)破壞性zui小，生活力zui高。通過使用巴氏德吸液管，讓細(xì)胞上培養(yǎng)基流動(dòng)。作為一種選擇你也可以輕輕拍打培養(yǎng)瓶。只有在必要的情況下，才使用胰酶消化細(xì)胞。
胰酶消化一個(gè)T25瓶的sf9細(xì)胞
1. 去除培養(yǎng)基。
2. 用2ml 1xPBS（足以覆蓋細(xì)胞表面）洗滌細(xì)胞，去除PBS.
3. 加入2ml 1x胰酶EDTA（恰好覆蓋細(xì)胞表面）。
4. 37℃孵育5到10分鐘。在儀器下檢測(cè)看到5分鐘后它們正在向上移動(dòng)。
5. 向細(xì)胞中加入2ml 細(xì)胞培養(yǎng)液，移入錐形管，用2ml培養(yǎng)液洗瓶壁，移入同一錐形管中。
6. 離心（1100rpm）沉淀細(xì)胞。去除培養(yǎng)基。
7. 用新的培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。傳代。
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