在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應，即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育（incubation），有人稱之為孵育，在ELISA試劑盒中似不恰當。ELISA試劑盒屬固相，抗原、抗體的結合只在固相表面上發生。
以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會，只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程，因此需經擴散才能達到反應的終點。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。
洗滌：
洗滌在ELISA試劑盒過程中雖不是一個反應步驟，但卻也決定著實驗的成敗。ELISA試劑盒就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質，以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。
FGFR1OP 成纖維細胞生長因子受體1原癌基因伴侶蛋白抗體
FAT 鈣粘蛋白家族成員7抗體
FNDC5 Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白2/5抗體
Filamin A 細絲蛋白A抗體
phospho-Filamin A (Ser2151) 磷酸化細絲蛋白A抗體
phospho-Filamin A(Ser2522) 磷酸化細絲蛋白A抗體
FANCG DNA損傷修復基因XRCC9抗體
phospho-FLNA (Tyr1046) 磷酸化細絲蛋白A抗體
phospho-FXYD1 (Ser83) 磷酸化磷酸神經膜抗體
Phospho-FGFR1+FGFR2 (Tyr463) 磷酸化堿性成纖維細胞生長因子受體1抗體
phospho-FXYD1 (Ser88) 磷酸化磷酸神經膜抗體
FOXN1 叉頭蛋白N1抗體
phospho-FANCG (Ser383) 磷酸化DNA損傷修復基因XRCC9抗體
FNDC1 Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白1抗體
ELISA試劑盒
