進口ELISA試劑盒經過多種試驗結果已證實，熒光酶聯免疫救贖具有很高的敏感性，但是若掌握不好也可帶來很高的背景染色，可有多種因素影響到zui終產物的酶結合位點的沉積，這是因為這個沉積過程是一種復雜的化學反應和物理變化的綜合結果。在ELF的反應過程中很容易形成假的熒光結晶，使FISH信號減弱，引起非特異性結晶沉積在組織細胞表面，造成背景信號，試驗結果證實，只要延長ELF的反應時間，就可以避免背景染色。
·熒光酶聯免疫技術避免背景染色的方法有3種。
1.商品化試劑盒內提供一種延時試劑。
2.在顯色液中加入4%PVP。
3.顯色時間控制在15~30min內。
進口ELISA試劑盒化學方法主要根據待測物與其他物質的化學反應、產生顏色變化來進行。該方法是zui早用于定量測定生物體內微量有機物質的基本方法。但因其檢出的靈敏度低(要求采樣很多)、特異性差，而且操作麻煩，因此也不利于推廣應用。
·如何分辨所購高靈敏ELISA試劑盒是否能測血清血漿樣本呢?
1.如沒有提供專門用于血清血漿樣本的緩沖液，那么只要用已知濃度的待測指標蛋白加入所測種屬的血清作為樣本加樣和用已知濃度的待測指標蛋白加入PBS緩沖液中同時檢測對比，即可知道該試劑盒是否可以直接用來測血清血漿樣本。
2.如提供專門用于血清血漿樣本的緩沖液，可用已知濃度的待測指標蛋白加入所測種屬的血清直接加樣和用緩沖液按說明書分別加樣，也可得出結果。
如該種類型試劑盒樣本總量如為100μl的話，一般而言，會是50μl的樣本加樣量和50μl的特定的緩沖液。
在使用進口ELISA試劑盒的過程，可將已知濃度的蛋白用血清或血漿調配到試劑盒標定的檢測限的zui高值的2倍，加入50μl做兩孔，一孔補入常規的50μl標準品稀釋液，一孔補入50μl樣本分析緩沖液，即可區分出效果來，有時候，有些為了達到“消除”的效果，在樣本分析緩沖液中加入待測目標蛋白，為了鑒別出這種情況，也可直接加入樣本分析緩沖液做一孔，同時做對比，這樣可試出高靈敏ELISA試劑盒中的針對血清血漿樣本的緩沖液是否真的有效。
