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ELISA試劑盒固相載體過程嚴格控制

閱讀:183發布時間:2016-11-30

ELISA試劑盒檢查試驗中,包被原的性質很主要,蛋白濃度,是不是降解,這到你做出的抗體可不可以被其識別,所以保留抗原很主要,做重組蛋白時,要在冰浴下緩慢融化即是這個道理。即是讓很多不相關的蛋白質充填這些曠地閑暇,然后排斥ELISA試劑盒后的過程中攪擾物質的再吸附。但有時因為試驗的需求,包被原的特殊性也可能選用中性的緩沖溶液來包。
ELISA試劑盒操作技巧:
1.加酶試劑后用吸水紙在酶標板外表輕拭吸干。
2.合理安排檢查量,避免反響板過多形成洗板等待時間長。
3.吸取液體時,要用量程和需求量挨近的槍去吸,減少差錯。
4.要盡量做雙孔試驗,這么才既能確保數據的準確性,ELISA試劑盒又能反映出試劑盒的精密度。
5.樣品稀釋液應用加液器加注,并經常校正其準確性。
6.為避免樣品蒸發,試驗時將反響板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。
7.未運用完的酶標板或許試劑,請于2-8℃保留。辣根過氧化物酶符號抗人IgG工作液請依據所需的量裝備運用。請勿重復運用已稀釋過的辣根過氧化物酶符號抗人IgG工作液。
8.ELISA試劑盒試驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。避免孵育時間人為延伸,致使非特異性結合緊附于反響孔周圍,難以清潔*。
9.剩下樣品及廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
10.ELISA試劑盒洗刷時各孔均需加滿液體,避免孔口有游離酶不能洗凈。
ELISA載體的形狀主要有三種:微量滴定板、小珠和小試管。以微量滴定板zui為常用,于EILSA的產品稱為ELISA板,上標準的微量滴定板為8×12的96孔式。為便于作少量標本的檢測,有制成8聯孔條或12聯孔條的,放入座架后,大小與標準ELISA板相同。ELISA板的特點是可以同時進行大量標本的檢測,并可在特制的比色計上迅速讀出結果。現在已有多種自動化儀器用于微量滴定板型的ELISA檢測,包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟,對操作的標準化極為有利。聚苯乙烯經射線照射后,其吸附性能特別是對免疫球蛋白的吸附性能增加,應用于雙抗體夾心法可使固相上抗體量增多,但用于間接法測抗體時空白值較大。
良好的ELISA板應該是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之間、同一板各孔之間、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別,各種產品的質量差異很大,因此,每一批號的ELISA板在使用前須事先檢查其性能。常用的檢查方法為:以一定濃度的人IgG(一般為10ng/ml)包被ELISA板各孔,洗滌后每孔內加入適當稀釋度的酶標抗人IgG抗體,保溫后洗滌,加底物顯色,終止酶反應后,分別測每孔溶液的吸光度。控制反應條件,使各孔讀數在吸光度0.8左右。計算全部讀數的平均值。所有單個讀數與全部讀數的均數之差,應小于10%。
與聚苯乙烯類似的塑料是聚氯乙烯。作為ELISA固相載體,聚氯乙烯的特點為質軟板薄,可剪割,價廉,但光潔度不如聚苯乙烯板,孔底亦不如聚苯乙烯平整。聚氯乙烯對蛋白質的吸附性能比聚苯乙烯高,但空白值也略高。
2,2′-聯氨-雙(3-...    英文名(EN):    ABTS diammonium salt,≥98%    CAS No.:    30931-67-0    規格(SP):    1G    類別(Key):    通用試劑
天青石藍    英文名(EN):    Celestine blue,80%    CAS No.:    1562-90-9    規格(SP):    1G    類別(Key):    通用試劑
酚試劑    英文名(EN):    3-Methyl-2-benzothialinone (HPLC,≥99....    CAS No.:    38894-11-0    規格(SP):    5G    類別(Key):    通用試劑
4-甲氧基苯乙酮    英文名(EN):    4-Methoxyacetophenone,99%    CAS No.:    100-06-1    規格(SP):    10G    類別(Key):    通用試劑
二苯基甲醇    英文名(EN):    Diphenylcarbinol,99%    CAS No.:    91-01-0    規格(SP):    25G    類別(Key):    通用試劑
4-(4-硝基苯偶氮)-1...    英文名(EN):    4-(4-Nitrophenylazo)-1-naphthol    CAS No.:    5290-62-0    規格(SP):    10G    類別(Key):    通用試劑
蒽酮    英文名(EN):    Anthrone (ACS,97%)    CAS No.:    90-44-8    規格(SP):    10G    類別(Key):    通用試劑
四丁基硫酸氫銨    英文名(EN):    Tetrabutylammonium hydrogensulfate,97%    CAS No.:    32503-27-8    規格(SP):    25G    類別(Key):    通用試劑
十五醇    英文名(EN):    1-Pentadecanol,99%    CAS No.:    629-76-5    規格(SP):    1G    類別(Key):    通用試劑
法尼醇    英文名(EN):    Farnesol,95%    CAS No.:    4602-84-0    規格(SP):    5ML    類別(Key):    通用試劑       ELISA試劑盒

 


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