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進(jìn)口ELISA試劑盒價格檢測樣本處理方法

閱讀:108發(fā)布時間:2017-12-15

進(jìn)口ELISA試劑盒價格檢測樣本處理方法
1、血清
血清是zui常用于elisa檢測的一類樣本,處理也比較簡單。用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本,將試管或離心管室溫放置2小時或4℃過夜,使血清析出。(將試管或離心管傾斜放置,使液面橫截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃ 1000×g離心20分鐘,仔細(xì)收集上清。建議將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。同時必須得注意,在采血的過程中應(yīng)避免溶血,以及避免細(xì)菌污染,以免造成實驗結(jié)果的不準(zhǔn)確。
2、血漿
用含抗凝劑的*或離心管采集血液標(biāo)本,標(biāo)本采集后30min內(nèi)4℃ 1000×g離心15min,取上清即血漿。將上清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。
3、尿液、唾液等其他液體生物樣本
1000×g離心20min,取上清即可檢測。為了保證檢測的準(zhǔn)確性,保存于-20℃或-80℃的樣本在1~6個月內(nèi)檢測;4℃保存的樣本應(yīng)在1周內(nèi)進(jìn)行檢測。
4、細(xì)胞裂解液
1.吸去培養(yǎng)板內(nèi)的培養(yǎng)基,用*消化細(xì)胞,加適量培養(yǎng)基將細(xì)胞從培養(yǎng)板上吹下來。懸浮細(xì)胞可省略。
2.收集細(xì)胞懸液,1000×g離心10min,棄去培養(yǎng)基,用預(yù)冷的pbs潤洗3次。
3.加入適量的預(yù)冷pbs或細(xì)胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細(xì)胞。通常6孔板一個孔的細(xì)胞量需要150~250μl pbs重懸。
4.將樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍,再放室溫解凍樣品,反復(fù)凍融幾次,使細(xì)胞充分裂解。也可將樣品進(jìn)行超聲破碎,以達(dá)到裂解的目的。
5.4℃ 10000×g 離心10min,除去細(xì)胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。
5、細(xì)胞培養(yǎng)上清
 取細(xì)胞培養(yǎng)上清到離心管,1000×g離心20min,除去細(xì)胞碎片及雜質(zhì),取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。
6、組織勻漿液
1.將組織樣本用pbs (0.01m, ph 7.4) 沖洗,洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì)。
2.將組織塊稱重,記錄后剪碎,碎塊應(yīng)盡量小,便于勻漿得更充分
3.將組織按一定的比例加入預(yù)冷的pbs(臨用前加入蛋白酶抑制劑)勻漿,勻漿比例為組織重量:pbs體積=1:9,勻漿時置于冰上或冰浴中。
 4.吸取勻漿液到離心管,4℃ 5000×g 離心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。
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