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植物葉綠體表達重組蛋白的研究

閱讀:511發布時間:2018-7-24

口ELISA試劑盒價格摘要:近年來,基因工程技術發展迅速,許多重組蛋白得以表達。其中利用植物生物反應器表達特異藥物蛋白為人類一些重要疾病的預防和治療提供了新途徑。植物葉綠體遺傳轉化和表達系統成為目前植物生物反應器的研究熱點。因結構和遺傳上的特殊性,高等植物葉綠體在重組蛋白表達方面具有*優勢,外源基因表達量高、定點整合,而且葉綠體母系遺傳特性保證了生物安全性。
很多重要藥用蛋白質在植物葉綠體中表達成功。煙草作為高等植物葉綠體轉化模式植物,在疫苗抗原、抗體等藥物蛋白和其他重要重組蛋白表達方面取得顯著進展。高等植物葉綠體遺傳轉化也為葉綠體基因的表達和調控機制的研究提供新的技術和方法。

文中從葉綠體遺傳轉化原理、載體構建、重組蛋白和重要藥物蛋白在葉綠體中的表達以及重組蛋白表達對植物代謝和性狀影響等多個角度,對高等植物葉綠體遺傳轉化體系研究的新進展進行了綜述,以期為葉綠體表達平臺的開發和重要藥用蛋白質的表達提供新思路。
近年來,隨著轉基因技術日漸成熟,利用轉基因技術表達重要重組蛋白的研究愈發受到關注。傳統的重組蛋白表達系統主要有大腸桿菌、酵母、哺乳動物細胞以及昆蟲細胞等。每種表達系統都有各自的優點,如大腸桿菌和酵母的遺傳背景清楚、培養操作簡單;昆蟲細胞可用于真核蛋白表達;哺乳動物細胞表達的重組蛋白接近天然蛋白。但仍有一些限制因素阻礙著這些表達系統的開發和商業化應用,譬如重組蛋白及后期純化成本高、效率低,重組蛋白的穩定性和安全性問題也難以保證。植物葉綠體遺傳轉化和表達體系是近年發展起來的一種新的重組蛋白表達系統。與植物細胞核表達平臺相比具有一些明顯優勢:1)葉綠體基因組拷貝數多,外源基因表達效率高;2)母系遺傳,外源基因不會隨花粉傳播而逃逸,生物環境安全性高;3)葉綠體基因組含有多順反子結構,多基因可共同表達;4)葉綠體由雙層膜包裹且無蛋白外流,為重組蛋白表達提供了一個相對安全的生物環境。
目前為止,高等植物遺傳轉化和表達體系已取得豐碩的研究進展和成果。2012年,FDA(U.S. Food and Drug Administration)批準Protalix公司以胡蘿卜細胞的、用于治療戈謝病的ELELYSOTM (Taliglucerase alfa)藥物正式上市。這是*用植物細胞作為生物反應器并獲得FDA認可的藥物。植物葉綠體在疫苗抗原、工業酶等重要重組蛋白和生物燃料方面也取得了顯著成就,尤其是某些重組蛋白能提高植物對非生物壓力的承受力,這對植物在逆境下生長具有重要意義。
為使葉綠體遺傳轉化與表達體系更加適應商業化模式,基因組學、蛋白質組學、植物細胞凍干法、核糖體圖譜和質譜技術等多種研究手段應用于葉綠體表達系統的開發研究。其中凍干植物細胞可在常溫下貯存數月而不失重組蛋白活性,簡化了發酵、提取、純化、低溫運輸、制備等工藝,有效降低了成本。

 


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