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培養基的選擇

閱讀:234發布時間:2015-3-6

(1)ELISA將基本培養基的大量成分或無機鹽成分減半至減四分之三(1/2,1/3,2/3,1/4,或3/4),或不同基本培養基成分組合如將B5的無機鹽成分與MS的有機成分組合在一起等;
(2)增減氮源水平及調銨態氮和硝態氮(銨鹽和硝酸鹽)的種類和比例,氮源通常對培養物的質量和發育路線影響較大;
(3)增加鈣鹽,以改善木本植物培養中的鈣缺乏;
(4)附加*、氨基酸及有機添加物,這對營養需求復雜或難培養的植物較為有效;
(5)對植物生長土壤及體內營養物質含量進行測定,給基本培養基改良提供參考;
(6)將無機鹽、有機成分及生長素和細胞分裂素劃分為高、中、低三個水平,進行81(34)種組合試驗,這樣更為。

總之,ELISA可通過培養基質量(成分)和數量(濃度)調整,優化和選擇與既定植物材料的特定要求相適合的基本培養培養基。植物組織培養基中經常改變的因子是生長調節物質,尤其是生長素和細胞分裂素。生長素和細胞分裂素的種類、數量和比例通常根據經驗或激素的性質與功能確定。但更科學的方法是采用單因子試驗法和多因子試驗法(正交設計),這樣可以采用生物統計學方法對結果進行分析。如以一種基本培養基為基礎,將生長素(如NAA)和細胞分裂素(如BA)各以9種濃度水平(0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0mg/l)組合成81種處理,可以得到的生長素和細胞分裂素濃度水平的組合。正交設計雖然科學合理,考慮到了兩類激素之間的互作,但工作量較大。實踐中也可以采用固定生長素濃度,改變細胞分裂素種類或濃度,選擇*的細胞分裂素種類和濃度;以及反過采用同樣的方法也可對生長素進行選擇?;蛘哂袝r為減少工作量,可代表性地配制數量較少的幾種組合(如生長素濃度相對高的一種,細胞分裂素濃度高的一種,生長素和細胞分裂素相平衡的一種),首先確定那類較為適合,然后根據適合的一類,利用單因子或多因子試驗法進一步確定zui適激素組合。確定zui適光照和溫度等因子的方法也同此。


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