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G蛋白偶合受體激酶2抗體

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更新時(shí)間：2016-03-07 00:40:54瀏覽次數(shù)：386次

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G蛋白偶合受體激酶2抗體經(jīng)過(guò)*實(shí)踐已經(jīng)發(fā)展的相當(dāng)成熟，在免疫學(xué)診斷中的應(yīng)用也相當(dāng)廣泛。

詳細(xì)介紹

G蛋白偶合受體激酶2抗體 動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法迄今為止，通常情況下均采用動(dòng)物體內(nèi)單抗的方法，鑒于絕大多數(shù)動(dòng)物用雜交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與同品系的脾細(xì)胞融合而得，因此使用的動(dòng)物當(dāng)然*BALB/c小鼠。本方法即將雜交瘤細(xì)胞接種于小鼠腹腔內(nèi)，在小鼠腹腔內(nèi)生長(zhǎng)雜交瘤，并產(chǎn)生腹水，因而可得到大量的腹水單抗且抗體濃度很高。可見(jiàn)該法操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)，不過(guò)，腹水中常混有小鼠的各種雜蛋白（包括Ig），因此在很多情況下要提純后才能使用，而且還有污染動(dòng)物病毒的危險(xiǎn)，故而用SPF級(jí)小鼠。 G蛋白偶合受體激酶2抗體 
 A、材料：a.  成年BALB/c小鼠。b.  降植烷（Pristane）或液體石蠟。c.  處于對(duì)數(shù)生*的雜交瘤細(xì)胞。

      B、方法：a.  腹腔接種降植烷或液體石蠟，每只小鼠0.3-0.5ml。b.  7-10天后腹腔接種用PBS或無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋的雜交瘤細(xì)胞，每只小鼠5×105/0.2ml。c.  間隔5天后，每天觀察小鼠腹水產(chǎn)生情況，如腹部明顯膨大，以手觸摸時(shí)，皮膚有緊張感，即可用16號(hào)針頭采集腹水，一般可連續(xù)采2-3次，通常每只小鼠可采5-10ml腹水；d.  將腹水離心（2000r/min 5分鐘），除去細(xì)胞成分和其他的沉淀物，收集上清，測(cè)定抗體效價(jià)，分裝，-70℃凍存?zhèn)溆茫騼龈杀４妗?br />公司產(chǎn)品詳情請(qǐng)參閱有關(guān)詳細(xì)論述鏈接點(diǎn)擊：  Human endotoxin,ET 人內(nèi)毒素（ET）
Human Peroxisome Proliferator-activated receptor γ,PPAR-γ 人過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體γ（ PPAR-γ）
Human Cyclosporine A,CsA 人*A（CsA）
Human glial fibrillary acidic protein,GFAP 人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）
Human 15-lipoxygenase,15-LO/LOX 人15脂加氧酶（15-LO/LOX）
Human glial fibrillary acidic protein,GFAP 人*酯轉(zhuǎn)移蛋白（CETP）
Human Leukotriene C4,LT-C4 人白三烯C4（LTC4）
Human Cytochrome-C,Cyt-C 人*（Cyt-C）
Human lipoprotein lipase,LPL 人脂蛋白脂酶（LPL）
Human Glycogen phosphorylase II,GP-II 人糖原磷酸化酶同工酶II（GP-II）
Human Glycogen phosphorylase MM,GP-MM 人糖原磷酸化酶同工酶MM（GP-MM）
Human Glycogen phosphorylase BB,GP-BB 人糖原磷酸化酶同工酶BB（GP-BB）
Human lipoprotein α,Lp-α 人脂蛋白α（Lp-α）
（2）  體外培養(yǎng)單抗的方法總體上講，雜交瘤細(xì)胞系并不是嚴(yán)格的貼壁依賴(lài)細(xì)胞（anchorage dependent cell，ADC），因此既可以進(jìn)行單層細(xì)胞培養(yǎng)，又可以進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。雜交瘤細(xì)胞的單層細(xì)胞培養(yǎng)法是各個(gè)實(shí)驗(yàn)室zui常用的手段，即將雜交瘤細(xì)胞加入培養(yǎng)瓶中，以含10-15%小牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)，細(xì)胞濃度以1×106-2×106/ml為佳，然后收集培養(yǎng)上清，其中單抗含量約10-50ug/ml。顯然，這種方法制備的單抗量極為有限，無(wú)疑是不適用于單抗的大規(guī)模。要想在體外大量制備單抗，就必須進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的大量（高密度）培養(yǎng)。單位體積內(nèi)細(xì)胞數(shù)量越多，細(xì)胞存活時(shí)間越長(zhǎng)，單抗的濃度就越高，產(chǎn)量就越大。


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