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19世紀末促進了成品預裝培養基平皿的發展

2025年02月12日 16:44四川省維克奇生物科技有限公司點擊量:23

成品預裝培養基平皿亦稱即用型培養基,是已經滅菌分裝好的,無需再稱量滅菌分裝的、可以直接使用的培養基。
  19世紀末,德國著名細菌學家科赫(Robert Koch,1843~1910)成功地制備了固體培養基,并發明了玻璃平皿,使細菌學得到重大的變革,極大地推動了細菌的分離、培養和鑒別技術,同時也促進了成品預裝培養基平皿的發展,滿足了微生物檢測的需要。
  為了能直接觀察微生物的形態及生長情況,科學家希望能將微生物培養在固體表面上,就像微生物生長在橘子皮或土豆上一樣。羅伯特·科赫曾用煮沸消毒的土豆來培養細菌。此后,他試著用明膠作培養基的凝固劑。他將明膠加入液體培養基中進行融化,然后將混合均勻的液體緩慢地倒在一塊玻璃板的表面。當明膠冷卻凝固后,就在玻璃板表面形成一層固體培養基。為了防止空氣中雜菌的污染,科赫還用玻璃罩將玻璃板與周圍環境隔離開來。
  但是,人們很快發現,明膠的凝固力非常弱。膠凝化溫度隨濃度及共存鹽類的種類、濃度、溶液的pH等因素變化而變化。溶解溫度與凝固溫度相差很小,明膠在20 ℃以上就變軟了,分離微生物的劃線操作非常困難。在溫度高于25 ℃時,明膠就液化了,而大多數細菌的培養溫度都不低于25 ℃。
  羅伯特·科赫的同事Walter Hesse也為同樣的問題苦惱著。一次,Walter Hesse的妻子Fannie建議他試一試用瓊脂做凝固劑,因為Fannie用瓊脂做果凍做得不錯。Walter Hesse采納了妻子的建議,發現瓊脂比明膠更適合做培養基的凝固劑,這使得在固體培養基的技術改進上邁出一大步。
  1887年,Richard Petri在Koch平皿技術上作了進一步的改進。Petri設計了一種圓形并帶有圍邊的雙盤,大盤作為皿蓋,而小盤當作皿底。制備固體培養基時,將融化的培養基倒入小盤內,然后再用大盤蓋在小盤上。這就是我們今天所使用的培養基平皿。
  自此之后,出現了世界聞名的美國Difco和英國Oxoid等培養基生產專業公司。其中美國Difco至今已有一百多年歷史, 1917年即開始生產脫水干燥培養基;1979年開始商品化生產成品預裝培養基平皿。1994年該產品進入中國市場。
  我國在20世紀50年代末開始研制干燥培養基,到目前已有100多個培養基廠家,干粉培養基品種已達300多種。近幾十年來,我國培養基事業有了飛速發展,在原材料的研究、開發及生產使用上都有了很大的進展,大大縮短了與發達國家的差距。
  有資料顯示,最早在中國生產的培養基平皿單位是國民黨中央防疫處,即中華人民共和國成立后組建的昆明生物制品研究所,其制備工藝為1:2牛肉湯,加蛋白胨、氯化鈉、條狀瓊脂,加熱充分溶解,補水定容;再用20%氫氧化鈉調節PH值為7.6,然后加熱煮沸,分裝于500ml的克氏瓶中,每瓶分裝250ml,分裝結束后將其進行121度,15分鐘高溫滅菌;滅菌完成后冷卻至50度,在潔凈環境且在火焰保護下分裝于已滅菌的玻璃平皿中,待冷卻凝固后放置在37度培養箱中培養3天,若無污染視為合格產品。
  隨著市場經濟的發展及手工制備的平皿具有效期短、成本高等弊端,小作坊式的手工生產已難以滿足工業大生產的需要,這樣的時代背景為成品預裝培養基平皿商品化創造了可行之路。20世紀80年代,中國市場上出現了國產商品化的成品預裝培養基平皿,且目前使用越來越廣泛,但是至今尚無市場管理措施和統一的質量標準及控制方法,致使商品化培養基平皿的質量缺乏穩定性及規范性,直接影響潔凈區微生物檢測結果的準確性和可靠性。
  隨著《藥品生產質量管理規范》和《中國藥典》不斷進步和優化,潔凈區微生物的檢測操作方法也隨之規范。總之,要達到藥品預期的質量要求,必須確保藥品生產過程中潔凈區微生物污染水平的真實性,從而就必須選擇符合質量要求的培養基平皿對潔凈區環境進行全過程的管理控制。
關鍵詞:培養箱
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