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2025年02月14日 09:50通派(上海)生物科技有限公司點(diǎn)擊量:57
細(xì)胞:NCTC 1469細(xì)胞
中文名稱:小鼠正常肝細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H+20%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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在細(xì)胞中可觀看抗原呈現(xiàn)細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)
在免疫反應(yīng)的產(chǎn)生過程中,縮氨酸與抗原呈現(xiàn)細(xì)胞的結(jié)合是一個(gè)關(guān)鍵步驟。如今,使用一種特別的方法,研究人員能夠在活細(xì)胞中看見這一結(jié)合過程。
主要組織相容性復(fù)合體(MHC)是脊椎動(dòng)物體內(nèi)與免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)密切相關(guān)的一個(gè)基因家族,是基因組中多態(tài)性豐富的區(qū)域。
在免疫反應(yīng)中,抗原縮氨酸被載入到MHC蛋白質(zhì)上。
與MHC結(jié)合的縮氨酸被呈現(xiàn)給T細(xì)胞,從而導(dǎo)致抗體的產(chǎn)生。但是,在調(diào)控縮氨酸載入MHC蛋白質(zhì)的生物學(xué)機(jī)理上,還存在著很多疑問。
一種經(jīng)修飾的縮氨酸,在活體中與MHC蛋白質(zhì)相連接時(shí),這種縮氨酸的熒光性會(huì)增加1000倍。樹突狀細(xì)胞是一種抗原呈現(xiàn)細(xì)胞。
利用這一方法,他們研究了樹突狀細(xì)胞在不同發(fā)育階段與縮氨酸結(jié)合的能力。出人意料,他們發(fā)現(xiàn)不成熟的樹突狀細(xì)胞也能有效地展示縮氨酸。
抗原呈現(xiàn)是引導(dǎo)恰如其分的免疫反應(yīng)過程一個(gè)關(guān)鍵步驟,而不恰當(dāng)?shù)拿庖叻磻?yīng)則會(huì)觸發(fā)自體免疫疾病,如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。新方法至關(guān)重要,因?yàn)樗兄诳茖W(xué)家們認(rèn)識(shí)抗原在活體中的呈現(xiàn)機(jī)制。
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