
2025年03月02日 14:38通派(上海)生物科技有限公司點擊量:47
細胞:ZR-75-30細胞
中文名稱:人乳腺導管癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:1640 培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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腫瘤基因組穩定性新機制
一個細胞分裂(cell pision)繁殖一次,它所有的DNA就要復制一次。而DNA復制的工具受損,或引起DNA修復損傷則可導致DNA復制壓力。
腫瘤細胞繁殖的速度快,要在更短的時間內繁殖同樣數量的DNA,引起復制損傷的幾率就更大。
在此前的研究中,該研究組曾發現了染色體斷裂的機制,染色體“脆性位點”(基因組特定區域)在細胞分裂(cell pision)期顯示為間隙或不連續的間隔區,脆性位點在物種間保守,且該區域染色體易斷裂,推測其對腫瘤相關聯的錯誤基因組重排有影響。
健康的細胞基因組是穩定的,基因組重排是導致健康細胞轉化為腫瘤細胞的一個重要因素之一;反過來,腫瘤細胞又需要基因組的穩定性,否則腫瘤細胞就會死亡。”應頌敏說。
根據這項研究,腫瘤細胞用M期的修復機制維持了基因組的穩定性,以滿足其存活和快速增殖的需要。
在腫瘤細胞中,癌基因誘導了DNA復制壓力,異常增殖的腫瘤細胞由于存在DNA復制壓力,它在“規定動作”的S期進行的DNA復制留下了很多的DNA損傷,使得DNA變得很不穩定,導致了腫瘤細胞的基因組不穩定性,進而驅動癌變。
近年來,肺癌等惡性腫瘤(malignant tumor)發病率不斷升高,目前的放療、化療等腫瘤治療手段對正常細胞傷害巨大。
有絲分裂期DNA復制的發現對包括核酸修復、復制和腫瘤等許多領域的研究將產生重要影響。
該發現是對脆性位點機制的重新審視,即脆性位點并非染色體真正斷裂,而是細胞分裂(cell pision)期新合成的DNA區域,它之所以看起來像斷裂,是因為新合成的DNA區域與染色體其他區域連接不緊密。
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