NMY51 Chemically Competent Cell 產(chǎn)品說明書

產(chǎn)品規(guī)格

NMY51：                     10×100μl            保存條件：- 80℃

PGADT7（control vector）：10ng/μl    10μl            保存條件：  4℃

Carrier DNA：            5ug/μl   100 μl            保存條件：  4℃

PEG/LiAc ：                       5 ml            保存條件：  4℃

基因型

MATa his3Δ200 trp1-901 leu2-3,112 ade2 LYS2::(lexAop)4-HIS3 ura3::(lexAop)₈-lacZ ade2::(lexAop) ₈-ADE2 GAL4

產(chǎn)品說明

NMY51感受態(tài)細(xì)胞是Dualsystems 開發(fā)的膜系統(tǒng)酵母雙雜宿主菌,

經(jīng)PGADT7質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率為10⁴cfu/μg DNA。

操作方法

1. 取100 μl冰上融化的NMY51感受態(tài)細(xì)胞，依次加入預(yù)冷的目的質(zhì)粒1-5ug，Carrier DNA（95-100度5min快速冰浴，重復(fù)一次）10 ul ，PEG/liAC  500ul并吸打幾次混勻，30度水浴30 分鐘（15 min時翻轉(zhuǎn)6-8次混勻）。

2. 將管放42度水浴15min  （7.5 min時翻轉(zhuǎn)6-8次混勻）。  

3. 5000 rpm 離心 40s 棄上清，ddH2O 400ul 重懸，離心 30s 棄上清。                      

4. ddH2O 50ul重懸，涂板。

5. 28-30度 ，培養(yǎng)48-96小時。

注意事項(xiàng)

1. 感受態(tài)細(xì)胞在冰上融化。

2. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。

3. 同時轉(zhuǎn)化2-3種質(zhì)粒時可增加質(zhì)粒的用量。