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人體內(nèi)的mRNA及microRNA (miRNA)不僅是胞內(nèi)通訊的信號(hào)分子,而且很多研究已經(jīng)表明,它們可以作為臨床診斷的分子標(biāo)記物.為了更好地加強(qiáng)對(duì)它們的理解和應(yīng)用,迫切需要對(duì)它們的物理性質(zhì)也進(jìn)行深入研究.在該實(shí)驗(yàn)中,研究者們利用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)檢測(cè)了精液特異的mRNAs、miRNAs及piRNAs.雖然通過(guò)time-course分析表明,cfs-miRNA的穩(wěn)定性與cfs-mRNA相似,但是對(duì)精漿采用過(guò)濾及Triton X-100處理后,cfs-miRNA及cfs-mRNA總量的變化特征卻是不同的,這暗示了它們可能有不同的物理性質(zhì).
隨后,精液的超微小泡(SMVs)被恢復(fù),并定量檢測(cè)了SMVs中的cfs-mRNA及cfs-miRNA的含量.結(jié)果顯示:SMVs內(nèi)cfs-mRNAs的含量幾乎與其重量一致,并且在不同大小的SMVs中高度可變.然而,大多數(shù)的cfs-miRNA卻獨(dú)立于SMVs存在于上層清液.之后,研究者們又通過(guò)對(duì)上層清液過(guò)濾及蛋白酶K的消化,進(jìn)一步研究了cfs-miRNA.他們發(fā)現(xiàn):cfs-miRNA可以通過(guò)0.10μm大小的孔,但在蛋白酶K的強(qiáng)烈消化后被顯著降解了.這項(xiàng)研究表明:cfs-mRNA主要存在于SMVs內(nèi),而大部分的cfs-miRNA結(jié)合于蛋白復(fù)合體.該結(jié)果闡明了人類精液中胞外RNAs的穩(wěn)定性、來(lái)源及潛在功能,為它們作為生殖系統(tǒng)標(biāo)記物的應(yīng)用研究提供了幫助.
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