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進口ELISA試劑盒技術(shù)原理:
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
(2). 結(jié)合在固相載體表面a的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。
(3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。
進口ELISA試劑盒注意事項:
1、 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底,避免開蓋時液體灑落。
2、 O13染色液為DMSO溶液,冬季氣溫較低時在室溫時為凝固狀態(tài),極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱溶解,吸頭也需要放在培養(yǎng)箱預(yù)熱,否者容易再次凝固在吸頭內(nèi)壁產(chǎn)生損耗。
3、使用前,先將本品取出回溫至室溫,并對其進行簡短離心使DMSO溶液集中于管底
4、盡量縮短探針標記后到測定所用的時間,以減少各種可能的誤差。
5、選做,陽性對照誘導(dǎo)劑可以按照1:1000的比例使用。例如標記好探針的細胞共1毫升,可以加入1μl的陽性對照誘導(dǎo)劑刺激。通常刺激后20-30分鐘內(nèi)可以觀察到非常顯著的活性氧水平升高。對于不同的細胞,活性氧陽性對照的效果可能有較大的差別。如果在刺激后30分鐘內(nèi)觀察不到活性氧的升高,可以適當提高活性氧陽性對照誘導(dǎo)劑的濃度。如果活性氧升高得過快,可以適當降低活性氧陽性對照誘導(dǎo)劑的濃度。
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