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細胞株培養技術要點合集2024/6/17
細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。國內資深的細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質或...
細胞凍存主要操作步驟2024/6/12
細胞凍存主要操作步驟：1、選擇處于對數生長期的細胞，在凍存前一天*換液。將多個培養瓶中的細胞培養液去掉，用0.25%yi蛋白酶消化。適時去掉yi蛋白酶，加入少量新培養液。用吸管吸取培養液反復吹打瓶壁上...
RT-PCR實驗提高逆轉錄保溫溫度方法2024/6/3
較高的保溫溫度有助于RNA二級結構的打開，增加了反應的產量。對于多數RNA模板，在沒有緩沖液或鹽的條件下，將RNA和引物在65℃保溫，然后迅速置于冰上冷卻，可以消除大多數二級結構，從而使引物可以結合。...
熒光定量PCR試劑盒反應特異性提高的方法2024/5/27
熒光定量PCR試劑盒反應特異性提高的方法：1.引物的設計引物最好在模板cDNA的保守區設計，長度15-30bp，GC含量小于60%，3’端不超過連續三個G或C，堿基分布錯落有致，避免引物自身形成二聚體...
抗原抗體反應特性說明2024/5/20
抗原抗體反應是指抗原與相應抗體之間所發生的特異性結合反應。這種反應既可在機體內進行，也可以在機體外進行。在機體內，當免疫細胞被抗原激活后，由B細胞分化成熟為漿細胞后所合成、分泌的一類能與相應抗原特異性...
ELISA測定實驗條件闡述2024/5/13
ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。ELISA實驗檢測具備條件闡述：1...
逆轉錄-聚合酶鏈反應 （RT-PCR） 實驗方法原理2024/5/6
逆轉錄-聚合酶鏈反應（ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction,RT-PCR）的原理是：提取組織或細胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，采用Oli...
ELISA試驗手工洗滌操作過程2024/4/28
洗滌在ELISA試驗過程中雖不是一個反應步驟，但卻也決定著實驗的成敗。ELSIA試驗就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質，以及在反...
細胞傳代問題分析2024/4/22
細胞傳代問題分析：1、傳代密度過高一旦細胞養太久至融合度過高(90%)才傳代，容易使細胞產生老化現象，甚至是堆疊，再消化細胞時不易吹打成單顆細胞，即便再重新鋪盤傳代，細胞也無法回到原本的特性了。(如：...
大鼠肺動脈內皮細胞培養實驗步驟2024/4/15
大鼠肺動脈內皮細胞培養實驗步驟：1、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。2、在超凈工作臺中，將大鼠斷頭置于玻璃培養皿中，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預冷的PBS玻...
常見的PCR反應淺析2024/4/8
常見的PCR反應淺析如下：1、常規PCR：直接PCR是指直接從樣品擴增目標DNA，無需進行核酸分離純化。2、熱啟動PCR：熱啟動PCR常用于增強PCR擴增的特異性。該方法主要利用抗體、親合配體、適體或...
腸球菌通用PCR檢測試劑盒實驗步驟2024/3/29
腸球菌通用PCR檢測試劑盒實驗步驟：1、產品僅用于科研取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其全溶解。2、兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振...
標準物質的五大特性類2024/3/25
標準物質的特性分為五大類：1、化學成分類：標準物質，純的化合物或是有代表性的基體樣品，天然的或添加(被)分析物的(如，用作農藥殘留分析的添加了殺蟲劑的動物脂肪)，以一種或多種化學或物理化學特性值表征。...
ELISA試驗避免血清沉積方法2024/3/18
ELISA試驗避免血清沉積方法：1、凍結血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，削減沉積的發作。2、血清分裝凍存時，須規矩搖晃均勻（當心勿形成氣泡），使溫度與成分均一。3、勿直接由-20℃直接至...
小鼠ELISA試劑盒結果的判定2024/3/11
小鼠ELISA試劑盒結果的判定：1、結果的判定嚴格依據試劑盒提供的陽性判定值（CO）進行結果判定。廠商提供試劑的同時，說明書上列出的CO值是建立在一系列科學試驗及統計研究的基礎上，不應隨意更改。定量測...
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